Terapia Epigenómica en la Enfermedad Cerebrovascular

El 55% de la población es portadora del alelo rs13702 C en el gen de la lipoproteinlipasa lo que bloquea la unión del microARN-410 a este gen que se modula por la dieta en términos de disminución de los triglicéridos y dando lugar a la reducción del riesgo de accidente cerebrovascular.

- Tema: El CIBEROBN descubre una nueva vía de prevención del ictus combinando genética, epigenética y dieta mediterránea

- Mecanismo epigenómico tratado: RNA interferente microARN-410 regulador del polimorfismo rs13702 T>C en el gen de la lipoproteinlipasa

- Cómo se lo hizo: Modulación a través de la alimentación dentro de un estudio de intervención dietética a largo plazo

- Resultados: Después de una media de 5 años de intervención con dieta mediterránea en los portadores del alelo C se comprobó un efecto de protección frente a ictus, con una reducción del riesgo de padecerlo que alcanzó un 42%. Sin embargo en los portadores del alelo C que no seguían una dieta mediterránea el efecto protector genético sólo fue del 6%. De esto se puede concluir que el factor protector inherente a la variante C se pierde con una dieta inadecuada.

Referencias bibliográficas:

1. CIBEROBN. El CIBEROBN descubre una nueva vía de prevención del ictus combinando genética, epigenética y dieta mediterránea. [Internet]. [citado 11 de enero del 2020]. Disponible en: https://www.ciberisciii.es/noticias/el-ciberobn-descubre-una-nueva-via-de-prevencion-del-ictus-combinando-genetica-epigenetica-y-dieta-mediterranea

2. Campo J.C. Una nueva vía de prevención del ictus une genética y dieta mediterránea. [Internet]. [citado 11 de enero del 2020]. Disponible en: https://www.lavanguardia.com/vida/20140811/54412965621/una-nueva-via-de-prevencion-del-ictus-une-genetica-y-dieta-mediterranea.html

Técnicas de Edición de Acidos Nucléicos en la enfermedad Cerebrovascular

Efecto de la terapia combinada del gen VEGF 165 / SDF-1 en la remodelación vascular y la perfusión sanguínea en la enfermedad cerebrovascular.

El factor 1 derivado de células estromales (SDF-1) y las proteínas del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) promueve sinergísticamente la angiogénesis. En este estudio, los autores evaluaron el efecto de la terapia génica combinada con VEGF 165 y SDF-1 en un modelo de rata de infarto cerebral.

- Tipo de Edición: In Vivo de  Células Somáticas

- Dirigido hacia: ADN-Genes VEGF 165 y SDF-1

- Dirigido por: Vector Adenoviral Ad- VEGF 165 -SDF-1

- Órgano a tratar: cerebro

- Vía de Administración: Microinyección Estereotáctica en el ventriculo cerebral derecho.

Resultados:
- Corto plazo: No hubo un aumento significativo de VEGF 165 ni de SDF-1 a los 3 días del tratamiento.

- Mediano Plazo: En el día 28 VEGF 165 y SDF-1 fueron ampliamente coexpresados en múltiples áreas de los cerebros de ratas en el grupo de tratamiento, incluyendo la corteza, cuerpo estriado, y la capa granular del hipocampo.
- Largo plazo: La coexpresión de VEGF 165 y SDF-1 mejoró la función neural, redujo el volumen de infarto cerebral, aumentó la densidad microvascular y promovió la angiogénesis en la penumbra isquémica, y mejoró el flujo sanguíneo cerebral y la perfusión.

Referencias bibliográficas:

1. Hu G., Feng Y. Efecto de la terapia combinada del gen VEGF 165 / SDF-1 en la remodelación vascular y la perfusión sanguínea en la enfermedad cerebrovascular [Internet]. 2017 [citado 04 de enero del 2020]. Disponible en: https://thejns.org/view/journals/j-neurosurg/127/3/article-p670.xml

Terapia Celular o Terapia con Stem Cells en la enfermedad Cerebrovascular

Terapia con Células Madre mononucleares de médula ósea por vía intravenosa para el accidente cerebrovascular

Tipo de Stem Cell: Células madre mononucleares de médula ósea (BMSC) autólogas.

Método de obtención: Obtención de las células de la médula ósea mediante aspiración aséptica desde la cresta ilíaca posterior del mismo paciente al que se le realizaría el tratamiento.

Vía de administración: infusión intravenosa de BMSC autólogas.

Usos: Probar la seguridad y eficacia del tratamiento con infusión intravenosa de BMSC autólogas para la neuroprotección en el tratamiento del accidente cerebrovascular

Resultados:

Corto Plazo: A los 7 días no se registró gran diferencia entre los pacientes a los que se les administro las BMSC y los pacientes a los que se trató de forma convencional (Pacientes de Control)

Mediano Plazo: 30 días después de administradas las BMSC autologas se evidenció una mejoria en los pacientes debido a que produjo una reducción del volumen del infarto protegiendo de esta manera las células nerviosas

Largo Plazo: A los 180 días se evidencia una mejoría en la función neurológica y no se notificó la presencia de efectos adversos de relevancia

Referencias bibliográficas:

1. Prasad K. Terapia con Células Madre mononucleares de médula ósea por vía intravenosa para el accidente cerebrovascular. [Internet]. [citado el 28 dic 2019]. Disponible en:  https://www.ahajournals.org/doi/10.1161/STROKEAHA.114.007028

Ejemplo de Transgénicos en la Enfermedad Cerebrovascular

Ratones resistentes al ictus isquémico inducido y al daño cardiovascular

La producción de TXA2 produce efectos protrombóticos y vasoconstricción, mientras que la producción de PGI2 produce vasodilatación, antitrombóticos y otros efectos protectores vasculares.

El gen COX-1-10aa-PGIS incorporado en ratones ejerce múltiples efectos sobre la circulación vascular in vivo 

- aumento de la biosíntesis de PGI 2

- reducción de la producción de TXA 2 trombótica

- disminución de la biosíntesis de PGE2 inflamatoria .

Este triple efecto podría resultar en una protección vascular sinérgica contra daños trombóticos y vasoconstrictores de enfermedades cardíacas in vivo .

Análisis:

- Tipo de Animal transgénico: Ratones transgénicos (CP-Tg) y Ratones WT "Knock in"

- Método de obtención: Purificación y aislamiento del gen transgénico COX-1-10aa-PGIS y posterior integración del mismo mediante microinyección pronuclear

- Usos: Protección vascular por efectos duales mediante el aumento de los niveles endógenos de PGI 2 y la disminución de los niveles de factor trombótico TXA 2 mediante actividad catalítica de COX-1-10aa-PGIS, generando resistencia al ictus y a daños cardiovasculares

Ventajas y desventajas de los transgénicos

- Ventajas:

1. Producción de biofármacos.

2. Producción de factores anti hemolíticos.

3. Se puede incorporar características no naturales como nutrientes o características morfológicas (forma, color, sabor, color).

4. Producción de vacunas obtenidas a partir de plantas transgénicas de bajo costo debido al material utilizado.

5. Los productos obtenidos son genéticamente más resistentes a plagas, enfermedades, son más fáciles de cultivar, recolectar.

- Desventajas:

1. Resistencia a los antibióticos.

2. El producto final puede generar agentes nuevos que inicien procesos de intolerancia o alergias alimentarias.

3. Los genes pueden no desarrollar el carácter de la forma esperada y puede aumentar el rechazo frente al gen extraño y pueden generar enfermedades.

4. Las bacterias y virus pueden incorporar un gen transgénico y tener resistencias al mismo.

5. Invasión de ecosistemas debido a la reproducción sin control de los alimentos transgénicos.

Referencias bibliográficas:

1. https://www.nature.com/articles/s41598-018-19661-y

2. https://www.agrobio.org/beneficios-cultivos-geneticamente-modifcados-colombia/#.XftTTWRKjIV

Ejemplo de ADN recombinante artificial en la Enfermedad Cerebrovascular

La eritropoyetina recombinante humana (rHu­EPO) puede mediar la neuroprotección indirectamente restaurando el flujo sanguíneo al tejido dañado o actúa directamente sobre las neuronas por activación de numerosas vías de señalización molecular. La molécula de rHu­EPO aumenta la expresión de enzimas antioxidantes y reduce la formación de radicales libres mediada por el óxido nítrico, a través de un mecanismo que involucra la Janus Tyrosin Kinase 2 (JAK2) y el factor nuclear NF­κB. Disminuye la excitotoxicidad neuronal, la cual se encuentra involucrada en muchas formas de lesión cerebral.

T: Neuroprotección con la Eritropoyetina Humana Recombinante en enfermedad cerebrovascular

O:  Uso de la Eritropoyetina Humana Recombinante para neuroprotección y tratamiento en las enfermedades cerebrovasculares.

G: rHu­EPO, genes inhibidores de la apoptosis XIAP y c­IAP2.62, 63, 64, 65, 66

E.R: Bcl­XL

E.L: Ligasa T4

V: plásmido

C.R: células nerviosas

M.T.G: Transfección

M.I.C: cultivo

Referencias bibliográficas:

1. Sosa I, García E. Neuroprotección con la Eritropoyetina Humana Recombinante en ECV. [Internet]. 2015. [citado 15 dic 2019]. Disponible en: http://revecuatneurol.com/wp-content/uploads/2015/06/Neuroproteccion.pdf

Recombinación de ácidos nucléicos que suceden en la naturaleza

ADN RECOMBINANTE

Es un tipo de ADN formado por la unión de dos moléculas de diferente origen. Se distingue entre el ADN recombinante natural, y el ADN recombinante sintético.

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA

El ADN recombinante en la naturaleza se recombina de manera natural por procesos como la infección viral reproducción sexual y la transformación bacteriana.

Por ejemplo, los virus transfieren su ADN envuelto en una cubierta con proteínas, entre bacterias, especies de eucariotas o virus, transfieren su material genético durante la infección. Dentro de la célula infectada, los genes se replican y dirigen la síntesis de proteínas virales

Referencias bibliográficas:

1. https://ivu.org/spanish/trans/ssnv-genetic.html

2. https://cdn.educ.ar/dinamico/UnidadHtml__get__3115e6c3-7a08-11e1-805a-ed15e3c494af/index.html

Técnica molecular epigenómica: Microarrays de miRNAs en Enfermedad Cerebrovascular Hemorrágica

Los miARN son importantes reguladores de la traducción y se han asociado con la patogénesis de una serie de enfermedades incluido el accidente cerebrovascular, y pueden ser posibles biomarcadores pronósticos. El propósito del presente estudio fue determinar los niveles de expresión de miARN en los sueros de pacientes con hemorragia subaracnoidea (HSA). La hemorragia subaracnoidea (HSA) generalmente es el resultado de un aneurisma roto y es un subconjunto de accidente cerebrovascular.

En el presente estudio, las muestras de suero en el día 3 después del inicio de HSA se sometieron a análisis de microarrays de miARN y análisis de PCR cuantitativa. Los resultados  sugieren que los niveles séricos de miR-502-5p , miR-1297 y miR-4320 pueden servir como nuevos biomarcadores para el diagnóstico y la progresión de la hemorragia subaracnoidea y estos miRNA pueden estar involucrados en la patogénesis de la HSA.

Referencias bibliográficas:

1. Lai NS, Zhang JQ, Qin FY, Sheng B, Fang XG, Li ZB. Serum microRNAs are non-invasive biomarkers for the presence and progression of subarachnoid haemorrhage. [Internet]. Biosci Rep.  Feb 2017. [citado 01 dic 2019]. Disponible en: https://portlandpress.com/bioscirep/article/37/1/BSR20160480/56516/Serum-microRNAs-are-non-invasive-biomarkers-for